Sentèz Peptid Difisil ak Idrofob

Sentèz Peptid difisil|Pèrsonalizasyon peptide idrofob|Sentèz Peptid difisil|Sentèz Sekans Cluster|Syans-Peptid

Sekans peptide twò idrofob? Agrégation fasil? Plizyè pè lyezon disulfid? Syans -Sèvis Peptide Difisil Sentèz Peptid ak Idrofob Peptide Sentèz espesyalize nan tout kalite "pa ka fè li" . 20 ane eksperyans, sistèm sòlvan espesyal, livrezon ki estab. Tanpri santi yo lib pou kontakte nou.

Ki kalite peptides yo konsidere kòm "difisil"?
Èske w te nan biznis sentèz peptide pou 20 ane, mwen te wè tout kalite peptides difisil. Lè kliyan vin jwenn nou, yo te deja mande plizyè konpayi, ak repons yo jwenn se swa "Mwen pa ka fè li" oswa "Eseye li, pa gen okenn garanti".

Peptide ak idrofobisite fò: rejyon transmembran, peptide siyal, asid amine idrofob, lè sentèz, li pral rasanble ansanm sou résine a, ak asid amine dèyè li pa pral kapab antre.
Peptid ki fasil pou rasanble, tankou peptides amiloid ak antimikwòb, yo anpile lè yo sentetize epi yo bouche kolòn nan lè yo pirifye.
Peptides ki gen plizyè pè lyezon disulfid: plis pase twa pè, yon sèl etap mal nan lòd la kouple ak molekil la tout antye depafini.
Long peptide: plis pase 60 asid amine, chak etap nan sede a ap diminye, epi nan fen pa gen anyen kite.
Konbinezon konplèks nan modifikasyon: fosforilasyon, fliyoresans, sikilasyon, ak kondisyon ki goumen youn ak lòt.
Nou ka pran yo tout, epi li pa "eseye", se "gen yon plan".

1. Hydrophobic peptides: ak sistèm sòlvan espesyalize
Difikilte pou peptides idrofob manti nan lefèt ke yo pa ka fonn nan solvang konvansyonèl yo, epi lè sentèz, chèn nan peptide "ansanm" sou résine a, ki fè li enposib pou asid amine ki dèyè li antre.

Solisyon nou an:
Konbinezon sòlvan espesyal: DMF, NMP, DCM sistèm melanje, plis yon ti ajan lage likid, se konsa ke chèn peptide a te kenbe lonje.
Optimizasyon tanperati: kèk reyaksyon pi bon nan 40 degre pase tanperati chanm, gen kèk ki dwe bese a 0 degre, nou te eseye yo youn pa youn.
Seleksyon résine: Sèvi ak résine solubilite segondè pou peptides idrofob pou kite ase espas pou chenn peptide.
Etikèt solubilize: Si ou pa kapab, ajoute yon etikèt idrofil epi koupe li apre sentèz.

Ka reyèl: yon peptide transmembrane 35aa, asid amine idrofob matirite pou 70%, kliyan an gade pou twa konpayi pa ka fè. Nou chanje sistèm sòlvan an epi ajoute etikèt solubilize, finalman pite a te 92%, ak kliyan an te fè etid estrikti a san pwoblèm.

2. miltip pè lyezon disulfid: pa gen chans, estrateji
Plis lyezon disulfid gen, se pi difisil pou pè yo. De pè yo byen, men twa oswa plis pè, ak yon sèl etap mal epi li nan tout fini.
Estrateji nou an:
Pwoteksyon òtogonal: Cys ka louvri ak pè nan etap lè l sèvi avèk diferan gwoup pwoteksyon, tankou Trt, Acm, tBu.
Optimizasyon kondisyon oksidasyon: oksidasyon lè, oksidasyon glutatyon, oksidasyon yòd, diferan metòd pou diferan peptides.
Entèmedyè QC: Apre chak pè, pran yon echantiyon pou MS epi konfime pè a anvan ou kontinye.
MS/MS konfimasyon (si ou vle): final kraze -ak segondè espektrometri mas pou wè ki kote lyezon disulfid yo aktyèlman tache.

A real case: A conotoxin peptide containing four pairs of disulfide bonds was rejected by many companies. We designed a four-step oxidation strategy, which took six weeks, and delivered >90% pite, kòrèkteman pè lyezon disulfid, ak estrikti nan kristal te imedyatman rezoud pa kliyan an.

3. Agregasyon -peptides ki gen tandans: sentèz pandan y ap defann
Gen kèk peptides natirèlman renmen total, tankou pwoteyin amiloid ak peptide anti-bakteri. Yo kòmanse rasanble lè yo sentèz, bloke kolòn nan lè yo pirifye, epi yo pa ka fonn lè yo nan men yo.
Solisyon nou an:
Pseudoproline: Pseudoproline prezante nan pozisyon Ser/Thr pou deranje tandans agregasyon an epi chanje tounen apre sentèz.
Segman sentèz: Peptides ki twò polymerize yo koupe an plizyè segman ak sentèz separeman, ak Lè sa a, rekonekte nan fen an.
Optimizasyon kondisyon pou pirifye: tanperati ki wo, pH asid, adisyon solvang òganik pou jwenn kondisyon ki fè li pa -polimerize.

4. Konbinezon modifye konplèks: kondisyon san batay
Gen kèk peptides ki gen plizyè kondisyon: fosforilasyon, etikèt fliyoresan, ak sikilasyon. Modifikasyon sa yo ka konfli youn ak lòt - pa egzanp, fosforilasyon se asid-fobik, etikèt fluoresan se limyè-fobik, epi sikilasyon mande pou yon pH espesifik.
Apwòch nou an:
Konsepsyon estrateji konsèvasyon: ki taye fè premye, ki taye fè pita, ki fèt davans.
Kondisyon òtogonal: Kondisyon yo nan chak etap nan reyaksyon an pa afekte modifikasyon yo deja fè.
Entèmedyè QC: Apre chak etap modifikasyon, pran yon echantiyon pou asire w li fè kòrèkteman anvan ou kontinye.

5. Pite: Tou depan de sa w ap fè ak li

Chak peptide akonpaye pa yon rapò HPLC ak MS, ki fè done yo pite transparan.

1. Nou fè sa depi 20 an
Sentèz Peptid difisil se pa yon bagay ke nenpòt moun ka fè. Pandan ane yo, nou te okipe yon anpil nan peptides difisil: pwoteyin transmembran, peptides fizyon viral, konotoksin, pwoteyin amiloid, peptides antimikwòb, elatriye Nou gen yon bon lide sou ki sekans ki gen tandans fè pwoblèm, ak ki kondisyon yo kapab sove yo. Omwen ou pa oblije eseye chak youn nan yo si ou vin jwenn nou pou Sentèz Peptid difisil ak idrofob.

2. Se pa "eseye", se "gen yon pwogram".
Yon anpil nan konpayi yo pran sou peptides difisil epi yo di, "Nou pral eseye li, men nou pa garanti li". Nou pa jwe konsa. Anvan ou aksepte yon lòd, nou pral evalye sekans lan, ki pwopòsyon asid amine idrofob, si gen nenpòt tandans agrégasyon li te ye, konbyen pè lyezon disulfid, epi si modifikasyon an se konplèks oswa ou pa. Apre evalyasyon, nou pral di ou: ki pousantaj siksè ak konbyen tan se tan sik la.

Nou pa pran lòd ki pa ka fèt, epi nou dwe remèt lòd ke nou te pran.

3. Sistèm sòlvan espesyalize pou idrofobisite
Peptid idrofob se pwen fò nou an. Si sòlvan konvansyonèl la pa ka fonn, nou pral chanje sòlvan an; si tanperati konvansyonèl la pa reyaji, nou pral ajiste tanperati a; si résine a konvansyonèl pa kenbe soti, nou pral chanje résine a. Genyen tou etikèt la solubilize kòm yon fason tounen soti.

4. Plizyè pè lyezon disulfid, etap-pa-etap
Si gen plis pase twa pè lyezon disulfid, nou pral pran yon apwòch etap-pa-: premye etap la se pwoteje A epi louvri premye pè a; pwoteje B epi louvri dezyèm pè a; pwoteje C epi louvri twazyèm pè a. Apre chak etap, nou pran echantiyon pou MS epi konfime kouple a anvan nou kontinye. Finalman, MS / MS yo pral kase ak verifye, epi done yo pral ba ou san ou pa devine.

5. Kontwòl kalite: done nan chak etap
Kontwòl kalite peptides difisil bezwen plis atansyon:
Entèmedyè QC: Apre chak fragman ak chak etap nan modifikasyon, mezire pite a ak pwa molekilè an premye.
Pwodwi fen: HPLC pou pite, MS pou pwa molekilè.
Tès Solibilite: Bay Solvang rekòmande ak metòd solubilizasyon, pou ou pa jwenn peptides ki pa fonn.
Lè w fè Sentèz Peptid difisil ak idrofob, done yo pale pou tèt li, chak etap ka remonte.

• Fòm livrezon: poud lyofilize, tib santrifujeur oswa flakon.
• Dokiman ki akonpaye yo: COA (pwofil HPLC + MS spectre), rapò sentèz (si ou vle).
• Tès opsyonèl: kontni peptide, endotoxin, imidite, konpozisyon asid amine, tès solubilite.
• Anbalaj Customized: pòsyon ak make selon kondisyon ou yo.
• Chak pwodwi difisil ak idrofob peptide sentèz revize pou asire ke sekans lan kòrèk epi pite a se jiska estanda anvan li voye l deyò.

Kit ou te rejte pa lòt moun, oswa ou pa ka fè li nan laboratwa pwòp ou a, ou ka pale ak nou. Si w ap chèche Syans-Peptide pou fè Sentèz Peptid difisil ak Idrofob, omwen ou pa bezwen eseye youn pa youn.

Mwen bezwen ou di mwen:
Sekans peptide (oswa enfòmasyon sib)
Èske w te fè nenpòt lòt moun fè li anvan? Ki rezilta a?
Konbyen (miligram)
kondisyon pite

Kilè ou vle li?

Ba w yon evalyasyon posibilite ak yon sitasyon pwogram nan lespas 24 èdtan.