Fliyoresans ak koloran etikèt Peptides

Meta Deskripsyon

Bezwen peptides fluoresan oswa koloran-pou imaj selilè oswa sitometri koule? Syans-Peptide bay sèvis sentèz peptide fluoresan ak lank-ki gen etikèt, FITC, FAM, TAMRA, Cy3/Cy5, biotin, rodamin ak lòt koloran yo disponib pou seleksyon, etikèt pwen fiks-, pite segondè, ak kontwòl kalite strik. Byenveni nan kontakte nou.

Fliyoresan ak koloran -peptides ki make: wè se kwè

Poukisa make peptides?
Nenpòt moun ki fè rechèch byolojik konprann ke souvan li pa ase pou gen yon peptide, men ou dwe kapab "wè" li - pou wè ki selil li te antre, ki pwoteyin li te mare, ak ki kote li te ale apre li te vwayaje nan kò a.

Fliyoresan ak koloran -peptides ki make fè sa. Lè yo atache yon gwoup fliyoresan oswa lank nan yon peptide, peptide a gen "je" epi yo ka swiv nenpòt kote li ale.

Ki eksperyans ki pa ka fè san li?
D 'selilè: pou wè si peptide a te antre nan selil la ak kote li rete
Sitometri koule: analiz de pwopòsyon de peptide -lye selil pozitif ki
Polarizasyon fliyoresan: yon etid sou afinite reseptè peptides-
Lokalizasyon tisi: gade distribisyon peptides nan bèt yo
Eksperyans FRET: etidye entèraksyon pwoteyin-pwoteyin yo

Ki sa nou ka fè

1. Kalite lank fluorescent, tou depann de sa ou bezwen

Kalite lank	Eksitasyon/emisyon longèdonn	Aplikasyon komen
FITC	495nm / 525nm	Koule, mikwoskòp fliyoresan, pri{0}}efikas
FAM	495nm / 520nm	Menm jan ak FITC, souvan itilize pou etikèt ADN/peptide
TAMRA	555nm / 580nm	FRET reseptè, imaj konfokal
Cy3	550nm / 570nm	Ki estab, segondè klète, souvan itilize pou D tisi
Cy5	650nm / 670nm	Byen lwen-wouj, tisi ki ba, apwopriye pou imaj in vivo
Rhodamine B	540nm / 625nm	Etikèt mitokondriyo, limyè ki estab
Rhodamine Wouj	570nm / 590nm	D 'selilè, rezistan a photobleaching
Biotin	Ki pa-lumine, ki baze sou afinite-	ELISA, rale-desann, istochimi

Gen lòt bezwen koloran? Alexa Fluor seri, Texas Red, Pacific Blue, ou non li, nou ka fè li.

2. Make Kote a, Gade Kote Ou Konekte

Sit makè yo	Ki jan yo konekte	Lè yo sèvi ak li
N-tèminal	Reyaksyon ester-NHS lank ak amine	Pi souvan itilize, pi pito lè N-tèminal inik
Lys sidechain	Reyaksyon ester-NHS lank ak ε-asid amine	Si gen plis pase yon Lys, li ka make owaza
Cys bò chèn	Reyaksyon lank-maleimid ak gwoup sulfhydryl	Trè espesifik, yo itilize lè Cys gratis prezan
C-suit	Konsepsyon espesyal obligatwa	itilize lè N-tèminal la konsève entak
Lokalizatè espesyal entèn	estrateji pwoteksyon ortogonal	Li bezwen fèt pou frape kote li vle di frape

3. make peptides ke nou kapab fè sentèz
Single Marker: Se sèlman yon sèl lank tache, pi souvan itilize
Double etikèt: de koloran diferan, fè FRET
Koloran + lòt modifikasyon: pa egzanp ak tou de fosforile oswa biotin
Makè trempe: egzanp EDANS/DABCYL FRET pè

4. Kapasite sentetik

Pwojè	Kapasite
longè peptide	5-80 asid amine
Kalite lank	FITC, FAM, TAMRA, Cy3, Cy5, rhodamine, biotin, ak lòt moun
Sit makè yo	N-tèminal, Cys, Lys, pwen fiks entèn
Opsyon nan pite	Konvansyonèl (85-95%), pite segondè (95-98%)
Yon sèl -pwodiksyon teren	1-20 mg (depann sou longè peptide ak lank)
fòm livrezon	Tib santrifij, sereng (kenbe lwen limyè)
Peryodikite	3-4 semèn (selon konpleksite maketing)

5. QC: Konfimasyon ke lank la tache
Kontwòl kalite fliyoresan ak peptides ki gen etikèt sou lank{0}} depann de si yo tache ak koloran an avèk siksè epi si pite a nan estanda a.

MS mas spèktrometri: pou wè si pwa molekilè a ogmante mas lank lan
HPLC: pou wè pite a, epi tou pou wè si gen nenpòt rezidi lank gratis

Poukisa rele nou pou peptides fluorescently make?

1. Nou fè sa depi 20 an
Fliyoresans ak koloran -pèptid ki gen etikèt ka sonnen tankou "yon lank", men toujou gen anpil ke trik nouvèl pou reyalize sit egzat, etikèt konplè, epi pa gen okenn asosyasyon nan fliyoresans. Pandan ane yo, nou te ede kliyan nou yo mete etikèt sou peptides divès kalite: soti nan etikèt ki pi senp FITC nan konplèks doub -sond FRET ki make, soti nan ti peptides nan peptides long, nou te akimile eksperyans.

2. Marker sit kontwòl, tout kote ou di
Gen kèk konpayi sèlman ki fè etikèt N-tèminal, kidonk ou pa ka di si w ap chanje kote yo. Nou diferan:
Etikèt tèminal N-: operasyon woutin, ak NHS ester, bon selektivite
Etikèt tach Cys: sèvi ak maleimide, segondè espesifik, apwopriye pou peptides ak Cys gratis
Lys make: ka kontwole, si gen yon sèl Lys, li se yon pwen fiks; si gen plis pase yon sèl, estrateji pwoteksyon ka fèt
Mak entèn pwen fiks-: pwoteksyon ortogonal, pwen ak tire

3. Yon pakèt koloran, tou de komen ak estraòdinè
Koloran komen: FITC, FAM, TAMRA, Cy3, Cy5, rhodamine, biotin
Koloran espesyal: Alexa Fluor seri, Texas Red, Pacific Blue, elatriye, yo ka Customized
Pè FRET: EDANS/DABCYL, Cy3/Cy5, elatriye

4. Pite sou demann, san yo pa gaspiye lajan
Woutin pi (85-95%): ase pou selilè D, koule
Segondè pite (95-98%): eksperyans quantitative, etid FRET, rezilta ki pi estab

5. Done yo konplè epi yo make byen klè
Nou bay done MS ak HPLC pou chak peptide ki make pou di w si koloran an tache oswa ou pa, ak ki jan pi li ye.

6. Soti nan tès depistaj jiska aplikasyon an, tout wout la
Apre w fin jwenn yon peptide ki make, souvan gen bezwen pou plis travay -suivi: pa egzanp, anplifikasyon pou imaj bèt, devlopman twous reyaktif, elatriye. Syans-Peptide ka entegre san pwoblèm, ak menm manadjè pwojè a swiv pwojè a jiska lafen, san yo pa bezwen kominikasyon repetitif.

Ki kote yo itilize peptides fluorescently

Zòn rechèch	Ki jan li fonksyone	Koloran rekòmande
imaj selilè	Tou depan de ki selil peptide a antre ak kote li rete	FITC, TAMRA, Cy3
Sitometri koule	analiz konbine avèk pwopòsyon selil pozitif ki	FITC, Cy5
pozisyon òganizasyonèl	gade distribisyon peptides nan bèt yo	Cy5 (tisi background ki ba)
FRET etid	etidye entèraksyon pwoteyin oswa chanjman konformasyon	EDANS/DABCYL,Cy3/Cy5
reseptè obligatwa	Mezi konbine avèk afinite	FITC, FAM
ELISA	kaptire oswa deteksyon	Biotin
nan D 'vivo	ti bèt vivan imaj	Cy5, Cy7

Livrezon ak kontwòl kalite

Livrezon: poud lyofilize, tib santrifijeur oswa flakon (pwoteje kont limyè)
Dokiman ki akonpaye yo: COA (graf HPLC pite, MS mas spectre), rapò sentèz (si ou vle)
Tès opsyonèl: kontni peptide, endotoxin
Anbalaj Customized: Separe ak mete etikèt sou selon kondisyon ou yo

Anvan chak peptide ki gen etikèt fluoresan ak lank-, nou revize etikèt, pite ak pwa molekilè pou asire done konplè ak bon jan kalite serye.

Twa ka lavi reyèl-

Ka 1: Pwogram peptide -penetrasyon selilè yon enstiti rechèch

The customer was studying a 15 amino acid periplasmic peptide and wanted to see what cells it entered. We synthesized a FITC-labeled periplasmic peptide (N-terminal labeling) with a purity of >95%, ak konfime etikèt siksè pa MS. Lè l sèvi avèk mikwoskòp koule ak konfokal, kliyan an te kapab wè klè ke peptide a te antre nan yon varyete selil timè, ak efikasite nan -penetrasyon manbràn te evidan.

Ka 2: Pwogram sond FRET, Biotech, Inc

Kliyan an te bezwen yon doub -peptide ki make pou deteksyon aktivite proteaz: EDANS nan yon bout ak DABCYL nan lòt bout la, nou byen presize sentèz Cys-Peptide-Lys, epi tache EDANS ak Cys (metòd maleimid) ak DABCYL nan Lys (metòd ester NHS). Tès kliyan an te montre ke rekiperasyon fliyoresans apre dijesyon te evidan ak pèfòmans sonde la te satisfezan.

Ka 3: devlopman ELISA pou yon konpayi reyaktif dyagnostik

The customer was developing an assay that required a biotin-labeled antigenic peptide for antibody capture. We synthesized a biotin-labeled peptide (Cys site-labeled) with purity >95% and biotin ligation efficiency >90%. Kliyan an te etabli avèk siksè yon metòd ELISA lè l sèvi avèk plak streptavidin ak sansiblite pikogram.

Pale sou bezwen peptide fluorescent ou yo?

Si w ap fè selil D, koule, FRET oswa ELISA, si w bezwen mete etikèt sou peptides, ou ka pale ak nou.

Ba ou yon sitasyon detaye ak fezabilite fidbak nan 24 èdtan.