Sentèz Glycopeptide

Sentèz Glycopeptide|Glycosylated Peptides|O-Glycopeptides ki lye|N-Glycopeptides ki lye|Syans-Peptide

Bezwen glycopeptides pou rechèch glikobiyoloji oswa mimicry glycoprotein?Sèvis-PeptideGlycopeptide Synthesis kouvri O-linkage, N-linkage, ak entwodiksyon de glikan konplèks.20 ane eksperyans, kontwòl egzak sou sit glikozilasyon. Tanpri santi yo lib pou kontakte nou.

Poukisa ou fè glycopeptides?
Pwoteyin yo raman "toutouni" nan kò a - pifò pote sik. Glikozilasyon afekte plisman pwoteyin, estabilite, rekonesans ak siyal. Si ou vle etidye fonksyon yon glikoprotein, oswa devlope yon antikò kont yon epitop glikan, li pa ase pou gen yon peptide toutouni, ou dwe tache glikan yo.

 

Difikilte pou Sentèz Glycopeptide se nan estrikti konplèks chèn glycan nan tèt li ak bezwen asire sit ki kòrèk la ak entegrite chèn glycan la lè yo tache ak peptide a; O-konjigezon an byen, men N-chèn glikan konjige yo pi long, sa ki fè difikilte pou sentèz la dirèkteman double. Nou te antre nan twou sa yo anvan, epi nou konnen ki jan yo jwenn alantou yo.

1. Kalite glikozilasyon: Tou de lyen O- ak N-yo fèt

Tou depan de objektif rechèch ou yo, nou pral pouse ki estrateji glikozilasyon ki pi apwopriye. Premye etap la nan sentèz Glycopeptide se chwazi bon chèn sik la ak lyen.

2. Longè chèn sik: soti nan monosakarid nan chenn sik konplèks
Modifikasyon monosakarid: GlcNAc, GalNAc, Man, Gal, elatriye, ki pi senp ak ki gen plis siksè.
Disakarid/trisakarid: pa egzanp, laktoz, chitosan, bezwen byen pwoteje pa donatè glycosyl.
Chenn sik konplèks: kalite mannoz ki wo, N-glikan konplèks, jiska nèf sik.
Sialylation: Lyen tèminal nan asid sialik imite sit la rekonesans nan glikoprotein natirèl.

3. Pwen kontwòl: presizyon, pa gen okenn devine
Ki sa ki pi gwo laperèz nan glikozilasyon? Glycoconjugation nan move sit la, oswa yon sit konekte men lòt sit la pa. Avèk estrateji pwoteksyon ortogonal nou an, nou ka prezante glikozilasyon nan yon sit espesifik epi kite lòt sit yo entak. Bezwen glikozile plizyè sit? Nou ka prezante yo youn pa youn epi kontwole yo byen klè.

4. Pite: Tou depan de Kondisyon eksperimantal

Chak glycopeptide akonpaye pa rapò HPLC ak MS, ak done ki sipòte entegrite nan chèn nan glikan ak sit ki kòrèk la.

5. Lòt modifikasyon sou glycopeptides
Glycopeptides yo konplèks ase pou kont yo, men kèk eksperyans mande pou yon ti kras lòt bagay:
Etikèt fliyoresan: FITC, TAMRA, Suivi destinasyon glycopeptide.
Biotin: rale-desann oswa teste.
Fosforilasyon: Simulation similtane glikozilasyon ak fosforilasyon pou etidye diafonia.
Etikèt izotòp: pou NMR oswa mas spectrometri quantification.

1. Glycochemistry + sentèz peptide, de -apwòch
Sentèz Glycopeptide difisil paske li travèse de domèn - glikochimi ak sentèz peptide. Moun ki fè sik ka pa konnen peptide, ak moun ki fè peptide ka pa konnen sik. Nou gen moun sou tou de bò yo, nou prepare donatè glycosyl la tèt nou, optimize kondisyon glycosylation pou kont nou, nou pa bezwen externalisation, epi nou ka ajiste pwoblèm yo poukont nou.

2. Estrateji pwoteksyon fleksib ak entegrite chèn sik la
Pandan glycosylation, chèn sik la tèt li dwe pwoteje, otreman kondisyon reyaksyon yo pral frape soti sik la. Nou gen divès kalite konbinezon de gwoup pwoteje ki ka estabilize chèn sik la anba kondisyon sentèz peptide, ak Lè sa a, kite sik la entak lè li depwoteksyon nan etap final la.

3. Kontwòl sit: konekte kote ou vle
Glycosylation Single Site: Yo prezante sik nan yon kote espesifye epi kite toutouni yon lòt kote.
Glikozilasyon milti-sit: diferan sit ka pote chenn sik diferan, ki ka prezante youn pa youn san yo pa entèfere youn ak lòt.
Glikozilasyon selektif: gen plizyè Ser/Thr, sèlman youn nan yo glikozile - reyalize pa estrateji konsèvasyon, pa pa pwobabilite.

4. QC: Èske chèn sik la entak? Èske sit yo kòrèk?
Glycopeptides gen plis pwoblèm nan kontwòl kalite pase peptides regilye::

MS molekilè pwa: ou ka di si sik la tache oswa ou pa lè w gade li.
MS/MS pou wè sit la (si ou vle): kraze peptide a pou wè ki asid amine sik la tache.
HPLC pou wè pite a: Gade tou pou enpurte desugarization.
Analiz konpozisyon sik: Mezi konpozisyon chèn sik ak lyen lè sa nesesè.
Done yo pou chak glycopeptide yo ba ou, kidonk ou pa bezwen devine.

5. Soti nan miligram a san miligram, tout wout la nan fen an
Miligram pou faz tès depistaj la, dis miligram pou faz validation, yon santèn miligram pou etid estriktirèl - nou ka pran tout bagay. Menm pwojè a, menm kontrepati a, pa bezwen re-amonize.

Biyoloji estriktirèl NMR / estrikti kristal nan chenn sik omojèn glikoprotein, etikèt izotopik

• Livrezon: poud lyofilize, tib santrifijeur oswa flakon, pwoteje pa nitwojèn.
• Dokiman ki akonpaye yo: COA (pwofil HPLC + pwofil MS), MS / MS (konfimasyon sit glikozilasyon).
• Tès opsyonèl: kontni peptide, endotoxin, imidite, analiz konpozisyon sik.
• Anbalaj Customized: pòsyon ak make selon kondisyon ou yo.
• Chak pwodwi Glycopeptide Synthesis yo double-tcheke anvan yo voye yo pou asire ke chèn sik la konplè epi sit yo kòrèk.

Kit ou vle glikopeptid senp modifye ak monosakarid, oswa glikan N-konplèks, nou ka pale. Omwen ou pa bezwen chèche yon moun sou tou de bout lè ou mande Syans-Peptide pou fè Sentèz Glycopeptide.

Mwen bezwen ou di mwen:
sekans peptide
Sit glikozilasyon ak estrikti chèn sik (referans yo pi bon)
Konbyen (miligram)
kondisyon pite

Kilè ou vle li?
Ba ou yon evalyasyon posibilite ak site nan 24 èdtan.